黄芩苷脂质体制备工艺的研究
来源: | 作者:admin | 发布时间:2012-6-18 访问人数: 441

黄芩苷脂质体制备工艺的研究

林彦君,吴品江,杨明*,魏萍

摘要:目的 确定黄芩苷脂质体的最佳制备工艺。方法 以逆相蒸发法制备黄芩苷脂质体,以包封率为评价指标,采用单因素考察和正交设计试验进行系统研究,考察了水相与有机相的比例、药物浓度、超声时间、水浴温度、旋转蒸发仪转速、大豆卵磷脂用量及类脂比等因素对脂质体包封效果的影响,从而确定黄芩苷脂质体的最佳制备工艺。结果  确定黄芩苷脂质体最佳制备工艺条件为:水相与有机相比例为1:4、黄芩苷投入量(药物浓度)为5mg/ml、磷脂用量为200g、卵磷脂与胆固醇比例为1:6,制得的脂质体平均粒径为178nm,包封率为50.3%。结论  逆相蒸发法制备的黄芩苷脂质体粒径小,包封率高,条件易掌握,可作为黄芩苷脂质体的常规制备方法。

关键词:黄芩苷;脂质体;制备工艺

Study on Preparing Technique of Baicalin Liposomes

LIN Yan-jun,WU Pin-jiang,YANG Ming*,WEI Ping

Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu, Sichuan,PRC

(611137)

Abstract  Objective:To study the preparing technique of baicalin liposomes  Method:  Bacalin liposomes were prepared by reverse-phase evaporation, A reasonable criterion of accurate evaluation was established by which such factors as the ratio of organic phase to aqueous phase ,rotation speed, waterbath temperature,hypersonic time, and the concentration of reactants were examined and the orthographic design was used and the best preparation technology is determined. Results: The optimized preparation conditions for baicalin phytosomes were obtained as follows: the ratio of aqueous phase to organic phase was 1 to 4. the dosage of phospholipid was 200mg.The ratio of phospholipid to cholesterin was 1 to 6. Baicalin concentration was 5 mg/ml. the mean diameter of liposomes was 178nm, envelopment percentage was 50.3%. Results: the optimized preparation is feasible and stable.

Keywords: baicalin; liposome; preparation

黄芩苷(baicalin)是中药黄芩主要有效成分之一,具有抗炎、抗病毒、清除自由基、抗氧化、扩张血管、调节免疫系统等多方面的药理作用,在肝炎、爱滋病、癌症等方面的应用前景非常广阔[1]。但由于脂溶性、水溶性差等原因造成体内吸收差、生物利用度低、药效不稳定,从而限制了临床的应用。近年研究表明,将药物制成的脂质体可有效地提高它在体内的吸收,显著改善其生物有效性[2]。鉴于此种情况,本文对黄芩苷脂质体的制备工艺进行了研究,为进一步研制高生物利用度的新制剂奠定一定的基础。

1  仪器与材料

1.1仪器

UV-1700型岛津紫外分光光度计;RE-53C型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);SHZ-DIII型循环水式真空泵 (浙江黄岩求精真空泵厂);层析柱(长25cm,口径2.5cm,天津玻璃仪器厂);79HW-1型恒温磁力搅拌器(江苏金坛市金城国胜实验仪器厂);BP61型sartorius电子分析天平(上海精科仪器厂);FA1104型上皿电子天平(上海精科仪器厂);RE-53C型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。

1.2试剂

黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号:110715-200514);黄芩苷提取物 (含量为97.2%,上海景森生物科技有限公司);大豆卵磷脂(含氮量>99.8%,成都市科龙化工试剂厂);胆固醇 (成都科龙化工试剂厂,批号:061019);Sephadex G-50 (上海楷洋生物技术责任有限公司);乙醚、三氯甲烷、甲醇、磷酸二氢钾、氢氧化钠均为分析纯。

 

2  实验方法与结果

2.1黄芩苷脂质体分析方法的建立

2.1.1测定波长的选择

分别取黄芩苷和空白脂质体适量,以pH7.0磷酸缓冲液溶解,配制成一定浓度的溶液,采用紫外分光光度法(《中国药典》2005年版一部附录VA)有关规定在200-400nm范围内紫外扫描。黄芩苷和空白脂质体的紫外扫描图见图1,黄芩苷在280nm波长处有最大吸收峰,在315nm亦有相对较强的吸收峰。而空白脂质体在黄芩苷的最大吸收波长280nm处有较大干扰,在黄芩苷的第二吸收波长315nm处无吸收,因此,选择在315nm为检测波长。

2

1

1. 黄芩苷   2. 空白脂质体

图1  200-400nm全波长紫外扫描图

2.1.2标准曲线的制备

精密称取黄芩苷标准品适量于10ml量瓶中,加pH7.0磷酸盐缓冲液溶解制成149μg/ml,从中取出0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.8ml于10ml量瓶中,用缓冲液稀释至刻度,得浓度为2.98,5.96,8.94,11.92,14.9,26.82μg/ml黄芩苷系列标准溶液。用缓冲液做空白,在315nm处分别测定吸光度,并且以黄芩苷浓度为横坐标(X),以吸光度为纵坐标(Y),作图并进行线性回归,得到回归方程为:y=0.0365x+0.0091,r=0.9991,在2.98~26.82μg/ml范围内测定线性关系良好,结果见图2-2。

图2 线性关系图

 

                    

[作者简介]林彦君(1980-),女,助教,主要研究方向是从事中药生产新技术和新剂型研究。